Грам толбо нь нянг эсийн хананы бүтцээр нь ялгах хамгийн хялбар аргуудын нэг тул микробиологид өргөн хэрэглэгддэг. Грамын дагуу бүх бактерийг грам эерэг (Грам (+)) ба грам сөрөг (Грам (-)) гэж хувааж болно. Грамаар будах аргыг 1884 онд боловсруулсан бөгөөд түүнээс хойш хэд хэдэн удаа өөрчлөгдсөн ч алдар нэрээ алдаагүй байна.
Эсийн хананы бүтэц
Грамаар будах нь тухайн нян грам эерэг эсвэл грам сөрөг эсэхийг харуулдаг. Бактерийг Грам (+) ба Грам (-) гэж хуваах нь тэдний эсийн хананы бүтцэд нийцүүлэн явагддаг.
Эсийн хананд хамгийн их хэмжээний пептидогликан (муреин) агуулагддаг бөгөөд үүнд пептапептид ба гликан ордог цогц бодис байдаг. Гликан нь хоорондоо β-1-ээр холбогдсон N-ацетилглюкозамин ба N-ацетилмурамик хүчлүүдийн ээлжлэн үлдэгдлээс тогтдог.4-гликозидын холбоо. Пептидогликан нь эсийн хэлбэрийг хадгалах, осмосын хамгаалалт, эсрэгтөрөгчийн үйл ажиллагааг хангадаг.
Грам эерэг ба грам сөрөг бактерийн үндсэн ялгаа
Өөр өөр бактериуд пептидогликан давхаргын зузаан өөр өөр байдаг. Грам эерэг гэж ангилдаг бактерийн хувьд 15-80 нм, харин грам сөрөг бактери нь 2-8 нм хооронд хэлбэлздэг. Үүний зэрэгцээ грам-сөрөг бактери нь пептидогликан давхаргын дор тусгай бүтэцтэй байдаг бөгөөд грам эерэг бактериуд байдаггүй - периплазмын орон зай. Энэ орон зай нь гидролитик ферментүүдээр дүүрдэг - β-лактамаза, рибонуклеаза 1, фосфатаза. Эдгээр ферментүүд нь грам сөрөг нянгийн олон антибиотикт тэсвэртэй байдлыг хариуцдаг.
Бактерийн Грам(-) пептидогликан давхарга нь эндотоксин агуулсан антиген бүтэц болох липополисахаридтай холбогддог. Грам(+) бактерийн хувьд тейхойн хүчлүүд ижил төстэй үүрэг гүйцэтгэдэг.
Грам сөрөг бактери нь нэмэлт бүтэцтэй байдаг - гаднах мембран.
Будах аргын мөн чанар
Будаж эхлэхээс өмнө судлагдсан бактерийн түрхэцийг бэлддэг. Үүнийг хийхийн тулд шилэн слайд дээр ус дусааж, бактерийн гогцоотой бичил биетний өсгөвөр нэмнэ. Дараа нь ус бүрэн хатсаны дараа т рхэцийг тогтооно - шилэн гулсуурыг шатаагчны дөл дээр хэд хэдэн удаа зөөвөрлөнө. Грамаар будах нь амьд бактерийг будахаас илүү үр дүнтэй байдаг - будгийн молекулууд үхсэн эстэй илүү сайн холбогддог.
Өнгийг хэд хэдэн үе шаттайгаар хийдэг:
- Шүүлтүүрийн цаасны жижиг хэсгүүдийг тогтсон түрхэц дээр тавьж, үндсэн будагч бодис болох гентиан ягаан эсвэл метилен хөхийг хийнэ.
- 3-5 минутын дараа өнгөт шүүлтүүрийн цаасыг авч, түрхэцийг Люголын уусмалаар 1 минут дүүргэнэ. Энэ тохиолдолд бэлдмэл нь харанхуйлна.
- Луголын уусмалыг шавхаж, түрхэцийг цэвэр этилийн спиртээр эмчилнэ: бэлдмэл дээр хэдэн дусал дусааж, 20 секундын дараа шүүнэ. Уг процедурыг 2-3 удаа давтана.
- Слайдыг нэрмэл усаар туршилтын бэлдмэлээр зайлна.
- Нэмэлт будалт үүсгэх - бэлдмэлийг фуксины уусмалаар дуусгах. 1-2 минутын дараа будгийг угаана.
- Ус хатсаны дараа т рхэцийг микроскопоор шалгана. Грам эерэг бактери нь хөх ягаан, грам сөрөг бактери нь ягаан эсвэл улаан өнгөтэй болно.
Өөр өөр будгийн шалтгаанууд
Дээр дурдсанчлан бактерийг грамаар будах нь грам эерэг бактерийг хөх ягаан, грам сөрөг бактерийг улаан эсвэл ягаан өнгөөр будна. Бактерийг энэ аргаар ялган будах болсон шалтгаан нь гентиан нил цэцгийн уусдаг хэлбэр эсэд орсны дараа будаг нь уусдаггүй иодын хэлбэрт шилждэг. Бактерийг этилийн спиртээр эмчлэх явцад энэхүү туйлшгүй уусгагчийн үйлчлэлээр липидийг мембранаас гаргаж авдаг. Дараа нь мембран нь сүвэрхэг болж, будаг уусгахад чухал саад болохгүй. Гэсэн хэдий чпептидогликан нь туйлшралгүй уусгагч, түүний дотор спиртэнд илүү тэсвэртэй байдаг. Энэ нь будгийг угаахаас сэргийлдэг тул зузаан муреин давхаргатай бактери нь хөх ягаан (грам эерэг) болж хувирдаг бөгөөд согтууруулах ундаа хэрэглэсний дараа өнгө нь өөрчлөгддөггүй.
Грам-сөрөг бактерийн нимгэн мурейн давхарга нь эсийн доторх будгийн молекулуудыг барьж чаддаггүй тул архины нөлөөгөөр өнгөгүй болдог - грам сөрөг өнгөөр будна.
Т рхэцэнд фуксины нэвчилт орсны дараа Грамаар будагдсан бактери нь цэнхэр ягаан туяатай хэвээр байх ба грам сөрөг бактери нь ягаан-улаан өнгөтэй болдог.
Грам(+) ба Грам(-) бактерийн жишээ
Грам сөрөг бактериудад цианобактери, хүхрийн бактери, төмрийн бактери, хламиди, риккетси, цууны бактери, олон метилобактери, тион бактери, хүнцэл бактери, карбоксибактери орно.
Бифидобактер, усны олон бактери, стрептококк, стафилококк нь Грам эерэг.
