Уураг нь бүх организмын зайлшгүй бүрэлдэхүүн хэсэг юм. Түүний молекул бүр нь амин хүчлээс бүрдсэн нэг буюу хэд хэдэн полипептидийн гинжээс бүрдэнэ. Амьдралд шаардлагатай мэдээлэл нь ДНХ эсвэл РНХ-д кодлогдсон байдаг ч рекомбинант уураг нь ферментийн катализ, хамгаалалт, дэмжлэг, хөдөлгөөн, зохицуулалт зэрэг организмд биологийн өргөн хүрээний үйл ажиллагааг гүйцэтгэдэг. Бие дэхь үйл ажиллагааны дагуу эдгээр бодисыг эсрэгбие, фермент, бүтцийн бүрэлдэхүүн хэсэг гэх мэт өөр өөр ангилалд хувааж болно. Чухал үүргийг нь харгалзан ийм нэгдлүүдийг эрчимтэй судалж, өргөнөөр ашигласан.
Өмнө нь рекомбинант уураг олж авах гол арга бол түүнийг байгалийн эх үүсвэрээс тусгаарлах явдал байсан бөгөөд энэ нь ихэвчлэн үр ашиггүй, цаг хугацаа их шаарддаг байв. Биологийн молекул технологийн сүүлийн үеийн дэвшлүүд нь тодорхой нэг төрлийн бодисыг кодлодог ДНХ-г бактери, мөөгөнцөр, шавьжны эс, хөхтөн амьтдын эс зэрэг бодисыг илэрхийлэх вектор болгон хувилах боломжтой болсон.
Энгийнээр хэлбэл, рекомбинант уургууд нь экзоген ДНХ-ийн бүтээгдэхүүнээр орчуулагддаг.амьд эсүүд. Тэдгээрийг авах нь ихэвчлэн хоёр үндсэн алхмаас бүрдэнэ:
- Молекулыг хувилах.
- Уургийн илэрхийлэл.
Одоогоор ийм бүтэц үйлдвэрлэх нь анагаах ухаан, биологийн салбарт хэрэглэгдэж буй хамгийн хүчирхэг аргуудын нэг юм. Энэхүү найрлага нь судалгаа, биотехнологийн салбарт өргөн хэрэглэгддэг.
Эрүүл мэндийн чиглэл
Рекомбинант уураг нь чихрийн шижин, хорт хавдар, халдварт өвчин, гемофили, цус багадалт зэрэг төрөл бүрийн өвчнийг эмчлэхэд чухал ач холбогдолтой. Ийм бодисын ердийн найрлагад эсрэгбие, гормон, интерлейкин, фермент, антикоагулянт орно. Эмчилгээний зориулалтаар ашиглах рекомбинант бэлдмэлийн хэрэгцээ улам бүр нэмэгдэж байна. Тэд танд эмчилгээний аргуудыг өргөжүүлэх боломжийг олгодог.
генетикийн аргаар боловсруулсан рекомбинант уураг нь эмчилгээний эмийн зах зээлд гол үүрэг гүйцэтгэдэг. Хөхтөн амьтдын эсүүд одоогоор хамгийн их эмчилгээний бодисыг үйлдвэрлэж байна, учир нь тэдгээрийн найрлага нь өндөр чанартай, байгалийн шинж чанартай бодис үйлдвэрлэх чадвартай. Түүнчлэн удамшлын шинж чанар сайтай, хурдацтай өсөлттэй, өндөр бүтээмжтэй учраас E. coli-д батлагдсан рекомбинант эмчилгээний олон уураг үүсдэг. Мөн энэ бодис дээр суурилсан эм бэлдмэлийг бий болгоход эерэг нөлөө үзүүлдэг.
Судалгаа
Рекомбинант уураг олж авах нь янз бүрийн арга дээр суурилдаг. Бодис нь биеийн үндсэн ба үндсэн зарчмуудыг олж мэдэхэд тусалдаг. Эдгээр молекулуудыг тодорхойлох, тодорхойлоход ашиглаж болноТухайн нэг генээр кодлогдсон бодисын байршил, мөн бусад генүүдийн эсийн дохиолол, бодисын солилцоо, өсөлт, репликаци ба үхэл, транскрипц, орчуулга, өөрчлөлт зэрэг эсийн янз бүрийн үйл ажиллагаан дахь үүргийг илчлэх.
Тиймээс ажиглагдсан найрлагыг ихэвчлэн молекул биологи, эсийн биологи, биохими, бүтэц, биофизикийн судалгаа болон шинжлэх ухааны бусад олон салбарт ашигладаг. Үүний зэрэгцээ рекомбинант уураг авах нь олон улсын практик юм.
Ийм нэгдлүүд нь эс хоорондын харилцан үйлчлэлийг ойлгоход хэрэгтэй хэрэгсэл юм. Эдгээр нь ELISA, иммуногистохими (IHC) зэрэг хэд хэдэн лабораторийн аргуудад үр дүнтэй болохыг баталсан. Рекомбинант уурагуудыг ферментийн шинжилгээг боловсруулахад ашиглаж болно. Зохих хос эсрэгбиетэй хослуулан хэрэглэвэл эсийг шинэ технологийн стандарт болгон ашиглаж болно.
Биотехнологи
Амин хүчлийн дараалал агуулсан рекомбинант уурагуудыг аж үйлдвэр, хүнсний үйлдвэрлэл, хөдөө аж ахуй, биоинженерийн салбарт мөн ашигладаг. Тухайлбал, мал аж ахуйд ферментийг хүнсэнд нэмснээр тэжээлийн орцын шим тэжээлийг нэмэгдүүлэх, зардал, хог хаягдлыг бууруулах, малын гэдэсний эрүүл мэндийг дэмжих, бүтээмжийг сайжруулах, байгаль орчныг сайжруулах боломжтой.
Үүнээс гадна сүүн хүчлийн бактери (LAB) удаан хугацаагаарайраг бүтээгдэхүүн үйлдвэрлэхэд ашиглагдаж байсан бөгөөд саяхан LAB нь амин хүчлийн дараалал агуулсан рекомбинант уургийг илэрхийлэхэд зориулагдсан бөгөөд үүнийг хүн, амьтан, хоол тэжээлийн боловсруулалтыг сайжруулахад өргөнөөр ашиглах боломжтой.
Гэсэн хэдий ч эдгээр бодисууд нь бас хязгаарлалттай:
- Зарим тохиолдолд рекомбинант уураг үйлдвэрлэх нь нарийн төвөгтэй, зардал ихтэй, цаг хугацаа их шаарддаг.
- Эсэд үүссэн бодисууд нь байгалийн хэлбэрт тохирохгүй байж болно. Энэ ялгаа нь эмчилгээний рекомбинант уургийн үр нөлөөг бууруулж, тэр ч байтугай гаж нөлөө үүсгэдэг. Түүнчлэн, энэ ялгаа нь туршилтын үр дүнд нөлөөлж болзошгүй.
- Бүх рекомбинант эмийн гол асуудал бол дархлаа үүсгэх чадвар юм. Биотехнологийн бүх бүтээгдэхүүн нь дархлаа үүсгэгч шинж чанартай байдаг. Шинэ эмчилгээний уургийн аюулгүй байдлыг урьдчилан таамаглахад хэцүү.
Ер нь биотехнологийн дэвшил нь төрөл бүрийн хэрэглээнд зориулагдсан рекомбинант уургийн үйлдвэрлэлийг нэмэгдүүлж, хөнгөвчлөх болсон. Хэдийгээр тэдгээр нь сул талуудтай хэвээр байгаа ч эдгээр бодисууд нь анагаах ухаан, судалгаа, биотехнологийн салбарт чухал ач холбогдолтой.
Өвчний холбоос
рекомбинант уураг нь хүний биед хоргүй. Энэ нь тодорхой эм, тэжээллэг элементийг боловсруулахад ерөнхий молекулын зөвхөн салшгүй хэсэг юм. Тарган хулганын лабораторийн омогт FGFBP3 (товчилсон BP3) уураг (товчилсон BP3)-ийг хүчээр илэрхийлэх нь тэдний биеийн өөхний хэмжээ мэдэгдэхүйц буурсан болохыг анагаах ухааны олон судалгаагаар харуулсан.хэрэглэхэд удамшлын урьдач байсан ч масс.
Эдгээр туршилтын үр дүн нь FGFBP3 уураг нь 2-р хэлбэрийн чихрийн шижин, элэгний өөхний өвчин зэрэг бодисын солилцооны синдромтой холбоотой эмгэгүүдэд шинэ эмчилгээг санал болгож болохыг харуулж байна. Гэвч BP3 нь хиймэл эм биш байгалийн уураг учраас хүний рекомбинант BP3-ийн эмнэлзүйн туршилтыг эмнэлзүйн өмнөх судалгааны эцсийн шатны дараа эхлүүлж болно. Өөрөөр хэлбэл, ийм судалгаа хийх аюулгүй байдалтай холбоотой шалтгаанууд байдаг. Рекомбинант уураг нь үе шаттайгаар боловсруулж, цэвэршүүлдэг тул хүний биед хор хөнөөл учруулахгүй. Молекулын түвшинд ч өөрчлөлт гарч байна.
Дархлаа эмчилгээний гол тоглогчдын нэг PD-L2 нь 2018 оны Физиологи, анагаах ухааны салбарын Нобелийн шагналд нэр дэвшсэн. АНУ-ын профессор Жеймс П. Аллисон, Японы профессор Тасүкү Хонжо нарын эхлүүлсэн энэхүү ажил нь меланома, уушгины хорт хавдар болон бусад төрлийн хорт хавдрыг хяналтын цэгийн дархлаа эмчилгээнд үндэслэн эмчлэхэд хүргэсэн. Саяхан AMSBIO өөрийн дархлалын эмчилгээний шугамандаа томоохон шинэ бүтээгдэхүүн болох PD-L2/TCR идэвхжүүлэгч CHO рекомбинант эсийн шугамыг нэмсэн.
Үзэл баримтлалыг нотлох туршилтаар Бирмингемийн Алабамагийн их сургуулийн доктор Х. Лонг Жэнг, профессор Роберт Б. Адамс болон UAB сургуулийн Эмгэг судлалын тэнхимийн лабораторийн анагаах ухааны захирал тэргүүтэй судлаачид Анагаах ухаан нь ховор боловч үхэлд хүргэдэг цус алдалтын эмгэг болох TTP-ийн боломжит эмчилгээг онцолсон.
Үүний үр дүнrADAMTS13-аар дүүрсэн тромбоцитыг цус сэлбэх нь төрөлхийн болон дархлалаар үүсгэгдсэн TTP-тэй холбоотой артерийн тромбозыг эмчлэх шинэ бөгөөд үр дүнтэй арга болохыг судалгаагаар анх удаа харуулж байна.
Рекомбинант уураг нь шим тэжээл төдийгүй боловсруулж буй эмийн найрлага дахь эм юм. Эдгээр нь одоо анагаах ухаанд хамрагдаж, түүний бүх бүтцийн элементүүдийг судлахтай холбоотой цөөн хэдэн салбар юм. Олон улсын туршлагаас харахад бодисын бүтэц нь молекулын түвшинд хүний бие махбодид тохиолддог олон ноцтой асуудлыг шийдвэрлэх боломжийг олгодог.
Вакцины хөгжүүлэлт
Рекомбинант уураг нь загварчлах боломжтой молекулуудын тодорхой багц юм. Үүнтэй төстэй өмчийг вакцин боловсруулахад ашигладаг. Тусгай рекомбинант вирусын тарилга гэгддэг вакцинжуулалтын шинэ стратеги нь эрсдэлтэй байгаа олон сая тахиа амьсгалын замын ноцтой өвчнөөс хамгаалж чадна гэж Эдинбургийн их сургууль болон Пирбрайтын хүрээлэнгийн судлаачид мэдэгдэв. Эдгээр вакцинууд нь вирус, нянгийн хор хөнөөлгүй эсвэл сул хувилбаруудыг ашиглан биеийн эсэд нянг нэвтрүүлэхэд ашигладаг. Энэ тохиолдолд мэргэжилтнүүд өөр өөр баяжуулалтын уураг бүхий рекомбинант вирусыг вакцин болгон ашиглаж, хор хөнөөлгүй вирусын хоёр хувилбарыг бий болгосон. Энэ холболтыг тойрсон олон төрлийн эм бий.
Рекомбинант уургийн худалдааны нэр ба аналогууд нь дараах байдалтай байна:
- "Фортелизин".
- "Залтрап".
- "Eylea".
Эдгээр нь голчлон хорт хавдрын эсрэг эмүүд боловч энэ идэвхтэй бодистой холбоотой бусад эмчилгээний чиглэлүүд байдаг.
Шинжлэх ухааны Nature Communications сэтгүүлд нийтлэгдсэн шинэ судалгаагаар хүмүүсийг Ласса халуурах, галзуу өвчний аль алинаас нь хамгаалах зорилготой LASSARAB хэмээх шинэ вакцин нь эмнэлзүйн өмнөх судалгаагаар найдвартай үр дүнг үзүүлсэн байна. Идэвхгүйжүүлсэн рекомбинант вакцинд нэр дэвшигч нь галзуугийн суларсан вирүс хэрэглэдэг.
Судалгааны баг Ласса вирусын удамшлын материалыг галзуугийн вирусын вектор руу оруулснаар вакцин нь Ласса болон галзуугийн эсүүдийн гадаргуугийн уургийг илэрхийлэх болно. Эдгээр гадаргуугийн нэгдлүүд нь халдварт бодисуудын эсрэг дархлааны хариу урвал үүсгэдэг. Дараа нь энэ вакциныг идэвхгүйжүүлж, тээгчийг бүтээхэд ашигладаг галзуугийн амьд вирүсийг "устгав".
Авах арга
Бодис үйлдвэрлэх хэд хэдэн систем байдаг. Рекомбинант уураг олж авах ерөнхий арга нь нийлэгжилтээс биологийн материалыг олж авахад суурилдаг. Гэхдээ өөр арга бий.
Одоогоор таван үндсэн илэрхийллийн систем байдаг:
- E. coli илэрхийлэх систем.
- Мөөгөнцрийн илэрхийллийн систем.
- Шавжны эсийг илэрхийлэх систем.
- Хөхтөн амьтны эсийг илэрхийлэх систем.
- Эсгүй уураг илэрхийлэх систем.
Сүүлийн сонголт нь трансмембран уургийг илэрхийлэхэд онцгой тохиромжтой.болон хорт нэгдлүүд. Сүүлийн жилүүдэд ердийн эсийн доторх аргаар илэрхийлэхэд хэцүү бодисуудыг in vitro орчинд эсэд амжилттай нэгтгэж байна. Беларусь улсад рекомбинант уургийн үйлдвэрлэлийг өргөнөөр ашигладаг. Энэ асуудалтай хэд хэдэн төрийн өмчит аж ахуйн нэгжүүд ажиллаж байна.
Эсгүй уургийн нийлэгжилтийн систем нь эсийн хандыг ферментийн системд транскрипц болон орчуулахад шаардлагатай төрөл бүрийн субстрат, энергийн нэгдлүүдийг нэмж зорилтот бодисыг нийлэгжүүлэх хурдан бөгөөд үр дүнтэй арга юм. Сүүлийн жилүүдэд нарийн төвөгтэй, хортой мембран зэрэг төрлийн бодисуудад эсгүй аргын давуу талууд аажмаар гарч ирсэн нь тэдгээрийг биофармацевтикийн салбарт ашиглах боломжтойг харуулж байна.
Эсгүй технологи нь төрөл бүрийн байгалийн бус амин хүчлүүдийг хялбархан, хяналттай нэмж, ердийн рекомбинант экспрессийн дараа шийдвэрлэхэд хэцүү нарийн төвөгтэй өөрчлөлтийг бий болгодог. Ийм аргууд нь хэрэглэх өндөр ач холбогдолтой бөгөөд вирус төст тоосонцорыг ашиглан эм хүргэх, вакцин боловсруулах боломжтой. Олон тооны мембраны уураг чөлөөт эсүүдэд амжилттай илэрхийлэгдэж байна.
Зохиолын илэрхийлэл
Рекомбинант уураг CFP10-ESAT 6-г үйлдвэрлэж, вакцин бүтээхэд ашигладаг. Ийм сүрьеэгийн харшил үүсгэгч нь дархлааны системийг бэхжүүлж, эсрэгбие үүсгэх боломжийг олгодог. Ерөнхийдөө молекулын судалгаа нь уургийн бүтэц, үйл ажиллагаа, өөрчлөлт, нутагшуулалт, харилцан үйлчлэл гэх мэт аливаа талыг судлах явдал юм. СудлахТодорхой бодисууд нь дотоод үйл явцыг хэрхэн зохицуулдаг талаар судлаачид сонирхол, ашиг тустай функциональ нэгдлүүдийг үйлдвэрлэх арга хэрэгслийг ихэвчлэн шаарддаг.
Уургийн хэмжээ, нарийн төвөгтэй байдлыг харгалзан химийн нийлэгжилт нь энэ оролдлого хийхэд тохиромжтой сонголт биш юм. Үүний оронд амьд эсүүд болон тэдгээрийн эсийн механизмыг ихэвчлэн өгөгдсөн генетикийн загварт үндэслэн бодисыг бий болгох, бүтээх үйлдвэр болгон ашигладаг. Дараа нь рекомбинант уураг илэрхийлэх систем нь эмийг бий болгоход шаардлагатай бүтцийг бий болгодог. Дараа нь янз бүрийн ангиллын эмэнд шаардлагатай материалыг сонгох хэрэгтэй.
Уургаас ялгаатай нь ДНХ нь сайн батлагдсан рекомбинант техникийг ашиглан нийлэг эсвэл in vitro аргаар бүтээхэд хялбар байдаг. Иймээс тусгай генийн ДНХ-ийн загваруудыг сурвалжлагчийн дараалал эсвэл хамаарлын шошго дараалалтай эсвэл нэмээгүй, хяналтанд байгаа бодисыг илэрхийлэх загвар болгон боловсруулж болно. Ийм ДНХ загвараас гаргаж авсан ийм нэгдлүүдийг рекомбинант уураг гэж нэрлэдэг.
Бодисыг илэрхийлэх уламжлалт стратеги нь загвар агуулсан ДНХ вектороор эсийг трансфекци хийх, дараа нь эсийг өсгөвөрлөх, хүссэн уургийг хуулбарлах, орчуулах явдал юм. Ихэвчлэн эсийг задалсан нэгдлүүдийг гаргаж аваад дараа нь цэвэршүүлдэг. Рекомбинант уураг CFP10-ESAT6 нь ийм аргаар боловсруулж, боломжтой бодисоос цэвэршүүлэх системээр дамждаг.хорт бодис үүсэх. Үүний дараа л вакцин болж нийлэгдэнэ.
Молекул бодисыг in vivo илэрхийлэх прокариот ба эукариот системийг хоёуланг нь өргөн ашигладаг. Системийн сонголт нь уургийн төрөл, функциональ үйл ажиллагаанд тавигдах шаардлага, хүссэн гарцаас хамаарна. Эдгээр илэрхийлэх системд хөхтөн амьтад, шавж, мөөгөнцөр, бактери, замаг, эсүүд орно. Систем бүр өөрийн гэсэн давуу талтай ба сорилттой бөгөөд тухайн хэрэглээнд тохирох системийг сонгох нь хянан үзэж буй бодисыг амжилттай илэрхийлэхэд чухал юм.
Хөхтөн амьтдын илэрхийлэл
Рекомбинант уураг хэрэглэх нь янз бүрийн түвшний вакцин, эм боловсруулах боломжийг олгодог. Үүний тулд бодис олж авах энэ аргыг ашиглаж болно. Хөхтөн амьтдын илэрхийлэлийн системийг физиологийн хувьд хамааралтай орчны улмаас хамгийн уугуул бүтэц, үйл ажиллагаа бүхий амьтны ертөнцөөс уураг үйлдвэрлэхэд ашиглаж болно. Үүний үр дүнд орчуулгын дараах боловсруулалт болон функциональ үйл ажиллагаа өндөр түвшинд байна. Хөхтөн амьтдын экспрессиональ системийг эсэд суурилсан функциональ шинжилгээнд ашиглахын тулд эсрэгбие, нарийн төвөгтэй уураг, нэгдлүүдийг үйлдвэрлэхэд ашиглаж болно. Гэсэн хэдий ч эдгээр үр өгөөжийг илүү хатуу соёлын нөхцөлтэй хослуулсан.
Хөхтөн амьтдын экспрессиональ системийг түр зуурын буюу экспрессийн бүтэц нь эзэн геномд нэгтгэгдсэн тогтвортой эсийн шугамаар уураг үүсгэхэд ашиглаж болно. Ийм системийг олон туршилтанд ашиглаж болох боловч цаг хугацааүйлдвэрлэл нь нэгээс хоёр долоо хоногийн дотор их хэмжээний бодис үүсгэж болно. Энэ төрлийн рекомбинант уургийн биотехнологи эрэлт ихтэй байна.
Эдгээр түр зуурын, өндөр бүтээмжтэй хөхтөн амьтдыг илэрхийлэх системүүд нь суспензийн өсгөвөр ашигладаг бөгөөд литр тутамд грамм гаргаж чаддаг. Нэмж дурдахад эдгээр уургууд нь бусад экспрессийн системүүдтэй харьцуулахад илүү төрөлхийн нугалах болон орчуулгын дараах өөрчлөлтүүд, тухайлбал гликозиляцитай байдаг.
Шавжны илэрхийлэл
Рекомбинант уураг үйлдвэрлэх арга нь зөвхөн хөхтөн амьтдад хамаарахгүй. Мөн 1 литр боловсруулсан шингэнд ногдох бодисын гарц хамаагүй бага боловч үйлдвэрлэлийн зардлын хувьд илүү үр дүнтэй аргууд байдаг.
Шавжны эсийг хөхтөн амьтдын системтэй төстэй өөрчлөлттэй өндөр түвшний уураг илэрхийлэхэд ашиглаж болно. Рекомбинант бакуловирүс үүсгэхэд ашиглаж болох хэд хэдэн систем байдаг бөгөөд дараа нь шавьжны эсээс сонирхсон бодисыг гаргаж авах боломжтой.
Рекомбинант уургийн илэрхийлэлийг хялбархан томруулж, молекулуудыг их хэмжээгээр нэгтгэхийн тулд өндөр нягтралтай суспензийн өсгөвөрт тохируулж болно. Эдгээр нь үйл ажиллагааны хувьд хөхтөн амьтны төрөлхийн найрлагатай илүү төстэй байдаг. Хэдийгээр гарц нь 500 мг/л хүртэл байж болох ч рекомбинант бакуловирүсийн үйлдвэрлэл нь цаг хугацаа их шаарддаг бөгөөд өсгөвөрлөх нөхцөл нь прокариот системээс илүү хэцүү байдаг. Гэсэн хэдий ч, илүү өмнөд болон дулаан орнуудад ижил төстэйаргыг илүү үр дүнтэй гэж үздэг.
Бактерийн илэрхийлэл
Бактерийн тусламжтайгаар рекомбинант уургийн үйлдвэрлэлийг бий болгож болно. Энэ технологи нь дээр дурдсан технологиос эрс ялгаатай. Бактерийг өсгөвөрлөхөд хялбар, хурдан ургадаг, рекомбинант найрлагаас өндөр ургац өгдөг тул нянгийн уураг илэрхийлэх систем түгээмэл байдаг. Гэсэн хэдий ч эсүүд орчуулгын дараах шаардлагатай өөрчлөлт эсвэл молекул нугалах үйлдлийг хийхээр тоноглогдоогүй тул бактериудад илэрхийлэгддэг олон домайн эукариот бодисууд ихэвчлэн ажиллахгүй байдаг.
Нэмж хэлэхэд, олон уураг нь уусдаггүй молекул болж хувирдаг бөгөөд тэдгээрийг хатуу денатуратор, дараа нь төвөгтэй молекул дахин нугалах процедургүйгээр нөхөн сэргээхэд маш хэцүү байдаг. Энэ аргыг ихэвчлэн туршилтын шинж чанартай гэж үздэг.
Эсгүй илэрхийлэл
Стафилокиназын амин хүчлийн дараалал агуулсан рекомбинант уургийг арай өөр аргаар гаргаж авдаг. Энэ нь олон төрлийн тарилгад багтсан тул хэрэглэхийн өмнө хэд хэдэн систем шаардлагатай.
Эсгүй уургийн илэрхийлэл нь орчуулгад нийцтэй бүхэл эсийн хандыг ашиглан бодисын in vitro нийлэгжилт юм. Зарчмын хувьд бүхэл эсийн ханд нь транскрипц, орчуулга, тэр ч байтугай орчуулгын дараах өөрчлөлтөд шаардлагатай бүх макромолекулууд болон бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг агуулдаг.
Эдгээр бүрэлдэхүүн хэсгүүдэд РНХ полимераз, зохицуулах уургийн хүчин зүйл, транскрипцийн хэлбэр, рибосом ба тРНХ орно. Нэмэх үедкофакторууд, нуклеотидууд болон тодорхой генийн загвар бүхий эдгээр хандууд нь хэдэн цагийн дотор сонирхож буй уурагуудыг нэгтгэж чаддаг.
Хэдийгээр том хэмжээний үйлдвэрлэлд тогтвортой биш ч эсгүй эсвэл in vitro уураг илэрхийлэх (IVT) систем нь ердийн in vivo системээс хэд хэдэн давуу талтай.
Эсгүй илэрхийлэл нь эсийн өсгөвөрлөхгүйгээр рекомбинант найрлагыг хурдан нийлэгжүүлэх боломжийг олгодог. Эсгүй системүүд нь уурагуудыг өөрчилсөн амин хүчлээр тэмдэглэж, эсийн доторх протеазаар хурдан протеолитик задралд ордог нэгдлүүдийг илэрхийлэх боломжийг олгодог. Нэмж дурдахад эсгүй аргыг (жишээлбэл, олон төрлийн рекомбинант ДНХ-ийн загваруудаас уургийн мутацыг бага хэмжээний экспрессээр шалгах) ашиглан нэгэн зэрэг олон янзын уураг илэрхийлэх нь илүү хялбар байдаг. Энэхүү төлөөллийн туршилтанд хүний каспаз-3 уургийг илэрхийлэхэд IVT системийг ашигласан.
Дүгнэлт ба ирээдүйн хэтийн төлөв
Рекомбинант уургийн үйлдвэрлэлийг одоо боловсорсон салбар гэж үзэж болно. Энэ нь цэвэршүүлэх, дүн шинжилгээ хийх олон тооны ахисан сайжруулалтын үр дүн юм. Одоогийн байдлаар зорилтот уураг гаргаж авах боломжгүй тул эм илрүүлэх хөтөлбөрүүд зогсох нь ховор байдаг. Хэд хэдэн рекомбинант бодисыг илэрхийлэх, цэвэршүүлэх, шинжлэхэд зориулсан зэрэгцээ процессуудыг одоо дэлхийн олон лабораторид сайн мэддэг болсон.
Уургийн иж бүрдэл, бүтээн байгуулалт өсөн нэмэгдэж буй амжилтууссан мембран бүтэц нь эрэлт хэрэгцээг хангахын тулд илүү их өөрчлөлт хийх шаардлагатай болно. Уургийг тогтмол нийлүүлэх үр дүнтэй гэрээт судалгааны байгууллагууд бий болсноор эдгээр шинэ сорилтуудыг шийдвэрлэхийн тулд шинжлэх ухааны нөөцийг дахин хуваарилах боломжтой болно.
Үүнээс гадна зэрэгцээ ажлын урсгалууд нь уламжлалт жижиг молекул эм илрүүлэх төслүүдийн хамт шинэ зорилтыг тодорхойлох, дэвшилтэт скрининг хийх боломжийг олгох үүднээс хяналтанд байгаа бодисын бүрэн сангуудыг бий болгох боломжийг олгох ёстой.
