Микробиологийн микроскопийн судалгааны аргууд

Агуулгын хүснэгт:

Микробиологийн микроскопийн судалгааны аргууд
Микробиологийн микроскопийн судалгааны аргууд
Anonim

Микроскопийн судалгааны аргууд нь тусгай төхөөрөмж ашиглан төрөл бүрийн объектуудыг судлах арга юм. Энэ нь хүний нүднээс хэтэрсэн хэмжээ нь бодис, организмын бүтцийг авч үзэх боломжийг бидэнд олгодог. Өгүүлэлд бид микроскопийн судалгааны аргуудад товч дүн шинжилгээ хийх болно.

микроскопийн судалгааны аргууд
микроскопийн судалгааны аргууд

Ерөнхий мэдээлэл

Бичил харуурын шинжилгээний орчин үеийн аргуудыг янз бүрийн мэргэжилтнүүд өөрсдийн практикт ашигладаг. Тэдний дунд вирус судлаач, цитологич, гематологич, морфологич болон бусад хүмүүс байдаг. Микроскопийн шинжилгээний үндсэн аргууд нь удаан хугацааны туршид мэдэгдэж байсан. Юуны өмнө энэ нь объектыг үзэх хөнгөн арга юм. Сүүлийн жилүүдэд бусад технологиуд практикт идэвхтэй нэвтэрч байна. Ийнхүү фазын тодосгогч, гэрэлтэгч, интерференц, туйлшрал, хэт улаан туяа, хэт ягаан туяа, стереоскопийн судалгааны аргууд түгээмэл болсон. Эдгээр нь бүгд янз бүрийн шинж чанарууд дээр суурилдаг. Света. Үүнээс гадна электрон микроскопийн судалгааны аргуудыг өргөн ашигладаг. Эдгээр аргууд нь цэнэглэгдсэн бөөмсийн чиглэсэн урсгалыг ашиглан объектуудыг харуулах боломжийг олгодог. Ийм судалгааны аргыг зөвхөн биологи, анагаах ухаанд ашигладаггүй гэдгийг тэмдэглэх нь зүйтэй. Аж үйлдвэрт металл, хайлшийг судлах микроскопийн арга нь нэлээд түгээмэл байдаг. Ийм судалгаа нь үе мөчний зан төлөвийг үнэлэх, эвдрэлийн магадлалыг багасгах, хүч чадлыг нэмэгдүүлэх технологийг боловсруулах боломжийг олгодог.

Хөнгөн арга: шинж чанар

Бичил биетэн болон бусад объектуудыг судлах ийм микроскопийн аргууд нь төхөөрөмжийн өөр өөр нарийвчлалд суурилдаг. Энэ тохиолдолд чухал хүчин зүйл бол цацрагийн чиглэл, объектын өөрийнх нь онцлог юм. Сүүлийнх нь ялангуяа тунгалаг эсвэл тунгалаг байж болно. Объектийн шинж чанарын дагуу гэрлийн урсгалын физик шинж чанар нь далайц ба долгионы урт, долгионы тархалтын хавтгай, үе шат, чиглэл зэргээс шалтгаалан гэрэл гэгээ, өнгө өөрчлөгддөг. Микроскопийн янз бүрийн судалгааны аргууд нь эдгээр шинж чанаруудын хэрэглээнд суурилдаг.

Онцлогууд

Гэрлийн аргаар судлахын тулд объектыг ихэвчлэн буддаг. Энэ нь тэдний зарим шинж чанарыг тодорхойлж, дүрслэх боломжийг олгодог. Энэ нь эд эсийг засах шаардлагатай, учир нь будалт нь зөвхөн үхсэн эсүүдэд тодорхой бүтцийг илрүүлдэг. Амьд эсэд будаг нь цитоплазмд вакуоль хэлбэрээр тусгаарлагддаг. Энэ нь бүтцийг буддаггүй. Гэхдээ гэрлийн микроскопын тусламжтайгаар амьд биетүүдийг мөн шалгаж болно. Үүний тулд судалгааны чухал аргыг ашигладаг. Ийм тохиолдолд харанхуй талбайн конденсаторыг ашигладаг. Үүнийг гэрлийн микроскоп дотор суулгасан.

микроскопийн судалгааны аргуудын шинжилгээ
микроскопийн судалгааны аргуудын шинжилгээ

Будаггүй объектуудыг судлах

Үүнийг фазын тодосгогч микроскоп ашиглан хийдэг. Энэ арга нь тухайн объектын онцлогтой уялдуулан цацрагийн дифракц дээр суурилдаг. Өртөх явцад фаз ба долгионы уртын өөрчлөлт ажиглагдаж байна. Микроскопын объектод тунгалаг хавтан байдаг. Амьд эсвэл тогтсон, гэхдээ өнгөт бус объектууд нь тунгалаг байдгаараа тэдгээрээр дамжин өнгөрч буй цацрагийн өнгө, далайцыг бараг өөрчилдөггүй бөгөөд энэ нь зөвхөн долгионы фазын шилжилтийг өдөөдөг. Гэхдээ үүнтэй зэрэгцэн объектоор дамжин өнгөрөхөд гэрлийн урсгал нь хавтангаас хазайдаг. Үүний үр дүнд объектоор дамжин өнгөрч, гэрлийн дэвсгэр рүү орох туяа хооронд долгионы уртын зөрүү гарч ирдэг. Тодорхой утгын хувьд харааны эффект үүсдэг - харанхуй объект нь цайвар дэвсгэр дээр тодорхой харагдах болно, эсвэл эсрэгээр (фазын хавтангийн онцлог шинж чанаруудын дагуу). Үүнийг авахын тулд ялгаа нь долгионы уртын дор хаяж 1/4 байх ёстой.

Anoptral арга

Энэ бол нэг төрлийн фазын ялгаатай арга юм. Аноптралийн арга нь зөвхөн арын гэрлийн өнгө, тод байдлыг өөрчилдөг тусгай хавтан бүхий линз ашиглах явдал юм. Энэ нь будаагүй амьд объектуудыг судлах боломжийг ихээхэн өргөжүүлдэг. Фазын тодосгогч микроскопийн судалгааны аргыг микробиологи, паразитологи, ургамал, амьтны эсийг судлахад ашигладаг.хамгийн энгийн организмууд. Гематологийн хувьд энэ аргыг цус, ясны чөмөгний элементүүдийн ялгааг тооцоолох, тодорхойлоход ашигладаг.

Интерференцийн техник

Эдгээр бичил харуурын судалгааны аргууд нь ерөнхийдөө фазын тодосгогчтой ижил асуудлыг шийддэг. Гэсэн хэдий ч сүүлийн тохиолдолд мэргэжилтнүүд зөвхөн объектын контурыг ажиглаж болно. Интерференцийн микроскопийн судалгааны аргууд нь тэдгээрийн хэсгүүдийг судлах, элементүүдийн тоон үнэлгээ хийх боломжийг олгодог. Энэ нь гэрлийн цацрагийн салаалалтаас болж боломжтой юм. Нэг урсгал нь объектын бөөмөөр дамжин өнгөрч, нөгөө нь өнгөрдөг. Микроскопын нүдний шилний хувьд тэдгээр нь нэгдэж, хөндлөнгөөс оролцдог. Үүссэн фазын ялгааг янз бүрийн эсийн бүтцийн массаар тодорхойлж болно. Үүнийг өгөгдсөн хугарлын индексээр дараалан хэмжсэнээр тогтворгүй эд, амьд биетийн зузаан, тэдгээрт агуулагдах уургийн агууламж, хуурай бодис, усны агууламж зэргийг тодорхойлох боломжтой. Олж авсан мэдээллийн дагуу мэргэжилтнүүд мембраны нэвчилт, ферментийн идэвхжил, эсийн бодисын солилцоог шууд бусаар үнэлэх чадвартай.

бичил харуурын шинжилгээний үндсэн аргууд
бичил харуурын шинжилгээний үндсэн аргууд

Туйлшрал

Энэ нь Никол призм эсвэл хальсан полароид ашиглан хийгддэг. Тэдгээрийг эм болон гэрлийн эх үүсвэрийн хооронд байрлуулна. Микробиологийн туйлшралын микроскопийн судалгааны арга нь нэг төрлийн бус шинж чанартай объектуудыг судлах боломжийг олгодог. Изотропик бүтцэд гэрлийн тархалтын хурд нь сонгосон хавтгайгаас хамаардаггүй. Энэ тохиолдолд анизотроп системд хурд нь дагуу өөрчлөгддөгобъектын хөндлөн буюу уртааш тэнхлэгийн дагуух гэрлийн чиглэл. Хэрэв бүтцийн дагуух хугарлын хэмжээ нь хөндлөн хугарлаас их байвал давхар эерэг хугарал үүсдэг. Энэ нь хатуу молекулын чиг баримжаатай олон биологийн объектуудын онцлог шинж юм. Тэд бүгд анизотроп шинж чанартай байдаг. Энэ ангилалд ялангуяа миофибрил, нейрофибрил, цилиант хучуур эд дэх цилиа, коллаген утас болон бусад зүйлс орно.

Туйлшралын утга

Туяа хугарлын шинж чанар ба объектын анизотропийн индексийг харьцуулах нь бүтцийн молекулын зохион байгуулалтыг үнэлэх боломжийг олгодог. Туйлшралын арга нь гистологийн шинжилгээний аргуудын нэг болж, цитологид ашиглагддаг гэх мэт Гэрэлд зөвхөн өнгөт объектуудыг судлах боломжгүй юм. Туйлшралын арга нь эд эсийн хэсгүүдийн будаагүй болон тогтворгүй эх бэлтгэлийг судлах боломжийг олгодог.

материалын судалгааны аргууд микроскопийн
материалын судалгааны аргууд микроскопийн

Люминесцент заль мэх

Тэдгээр нь спектрийн хөх ягаан хэсэг эсвэл хэт ягаан туяанд гэрэлтэх зарим объектын шинж чанарт суурилдаг. Уураг, зарим витамин, коэнзим, эм зэрэг олон бодисууд нь анхдагч (дотоод) гэрэлтэх чадвартай байдаг. Флюрохром, тусгай будаг нэмэхэд бусад объектууд гэрэлтэж эхэлдэг. Эдгээр нэмэлтүүд нь бие даасан эсийн бүтэц эсвэл химийн нэгдлүүдэд сонгомол эсвэл сарнисан байдлаар тархдаг. Энэ шинж чанар нь гистохимийн болон гэрэлтэлтийн микроскопийг ашиглах үндэс суурь болсонцитологийн судалгаа.

Хэрэглэх хэсэг

Дархлаа-флюресценцийг ашиглан мэргэжилтнүүд вирусын эсрэгтөрөгчийг илрүүлж, тэдгээрийн концентрацийг тодорхойлох, вирус, эсрэгбие болон эсрэгтөрөгч, гормон, янз бүрийн бодисын солилцооны бүтээгдэхүүн гэх мэтийг тодорхойлно. Үүнтэй холбогдуулан герпес, гахайн хавдар, вируст гепатит, томуу болон бусад халдварын оношлогоонд материалыг судлах гэрэлтэгч аргыг ашигладаг. Микроскопийн иммунофлуоресценцийн арга нь хорт хавдрыг таних, зүрхний шигдээсийн эхний үе шатанд зүрхний ишемийн хэсгийг тодорхойлох, гэх мэт боломжийг олгодог.

металл болон хайлшийг судлах микроскопийн арга
металл болон хайлшийг судлах микроскопийн арга

Хэт ягаан туяа ашиглах

Энэ нь амьд эс, бичил биетэн эсвэл тогтсон боловч өнгөгүй, харагдахуйц-гэрлийн тунгалаг эдэд багтдаг хэд хэдэн бодис тодорхой долгионы урттай хэт ягаан туяаг шингээх чадварт суурилдаг. Энэ нь ялангуяа макромолекулын нэгдлүүдийн хувьд ердийн зүйл юм. Үүнд уураг, үнэрт хүчил (метилаланин, триптофан, тирозин гэх мэт), нуклейн хүчил, пирамид ба пурины суурь гэх мэт орно. Хэт ягаан туяаны микроскоп нь эдгээр нэгдлүүдийн нутагшуулалт, хэмжээг тодруулах боломжийг олгодог. Мэргэжилтнүүд амьд биетүүдийг судлахдаа тэдний амьдралын үйл явцын өөрчлөлтийг ажиглаж чадна.

бичил харуурын шинжилгээний орчин үеийн аргууд
бичил харуурын шинжилгээний орчин үеийн аргууд

Нэмэлт

Хэт улаан туяаны микроскоп нь гэрэл болон хэт ягаан туяанд тунгалаг бус объектуудыг шингээж авах замаар судлахад ашигладаг.урсгалын бүтэц, долгионы урт нь 750-1200 нм. Энэ аргыг хэрэглэхийн тулд бэлдмэлийг химийн эмчилгээнд урьдчилан оруулах шаардлагагүй. Дүрмээр бол хэт улаан туяаны аргыг антропологи, амьтан судлал болон бусад биологийн салбарт ашигладаг. Анагаах ухааны хувьд энэ аргыг голчлон нүд судлал, нейроморфологид ашигладаг. Эзлэхүүний объектын судалгааг стереоскопийн микроскоп ашиглан хийдэг. Тоног төхөөрөмжийн загвар нь зүүн, баруун нүдээр янз бүрийн өнцгөөр ажиглалт хийх боломжийг олгодог. Тунгалаг бус объектыг харьцангуй бага өсгөлтөөр (120 дахин ихгүй) шалгадаг. Стереоскопийн аргыг бичил мэс засал, эмгэг судлалын болон шүүх эмнэлгийн салбарт ашигладаг.

Электрон микроскоп

Эс, эд эсийн бүтцийг макромолекул болон эсийн доорх түвшинд судлахад ашигладаг. Электрон микроскоп нь судалгааны салбарт чанарын үсрэлт хийх боломжтой болсон. Энэ аргыг биохими, онкологи, вирус судлал, морфологи, дархлаа судлал, генетик болон бусад салбаруудад өргөн ашигладаг. Тоног төхөөрөмжийн нарийвчлалын мэдэгдэхүйц өсөлт нь цахилгаан соронзон орны дундуур вакуумд дамждаг электронуудын урсгалаар хангадаг. Сүүлийнх нь эргээд тусгай линзээр бүтээгдсэн байдаг. Электронууд нь объектын бүтцээр дамжин өнгөрөх эсвэл өөр өөр өнцгөөр хазайх чадвартай байдаг. Үүний үр дүнд багажийн гэрэлтэгч дэлгэц дээр дэлгэц үүсдэг. Дамжуулах микроскопоор хавтгай дүрсийг сканнердах замаар эзэлхүүнтэй дүрсийг авдаг.

электрон микроскопийн судалгааны аргууд
электрон микроскопийн судалгааны аргууд

Шаардлагатай нөхцөл

Электрон микроскопийн шинжилгээнд хамрагдахын өмнө объектыг тусгай бэлтгэлд хамруулдаг гэдгийг тэмдэглэх нь зүйтэй. Ялангуяа эд, организмын физик эсвэл химийн бэхэлгээг ашигладаг. Хэсгийн болон биопсийн материалыг усгүйжүүлж, эпокси давирхайд шингээж, очир алмааз эсвэл шилэн хутгаар хэт нимгэн хэсгүүдэд хуваана. Дараа нь тэдгээрийг хооронд нь харьцуулж, судалж үздэг. Сканнерийн микроскопоор объектын гадаргууг шалгана. Үүнийг хийхийн тулд тэдгээрийг вакуум камерт тусгай бодисоор шүршинэ.

Зөвлөмж болгож буй: